Resumen
Se describe una nueva forma de medir la concentración de anticuerpos mediante la técnica ELISA. En el nuevo procedimiento, el punto final está determinado por la intensificación del color que tiene lugar cuando los pocillos de una placa de ELISA, que contienen anticuerpos, se revelan mediante la enzima peroxidasa y el sustrato diaminobencidina-níquel, con intensificación posterior del color con plata: A medida que disminuye la concentración de anticuerpos (y por tanto de peroxidasa), en una dilución seriada, el color se torna cada vez más débil hasta que se intensifica de nuevo y después se desvanece (cuando la concentración de anticuerpo es muy baja). La dilución a la que ocurre la intensificación del color se puede utilizar como una medida de la concentración de anticuerpos y, de esta manera, las concentraciones de las muestras problema se pueden calcular si se incluye una muestra estándar de concentración conocida: el cociente (factor de dilución de la muestra problema / factor de dilución de la muestra estándar) refleja la relación (concentración de anticuerpos en la muestra problema / concentración de anticuerpos en la muestra estándar). En este artículo se confirma la validez y la precisión del procedimiento propuesto.
Palabras clave
ELISA, plata, diaminobencidina, poli (lisina, fenilalanina), medida de anticuerpos
Clasificación en siicsalud
Artículos originales> Expertos de Iberoamérica>
página www.siicsalud.com/des/des038/04524045.htm
Especialidades
Principal: Diagnóstico por Laboratorio
Relacionadas: Bioquímica, Inmunología
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Artículo completo
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FURTHER RESEARCH IN DIG-ELISA: A NEW END-POINT FOR ELISA
Abstract
This report describes a new procedure to measure the antibody concentration by ELISA. The new procedure is based on the color intensification that took place when ELISA plates containing antibodies were revealed with peroxidase and diaminobenzidine-nickel and further intensification with silver: In a serial dilution, as the antibody concentration (and therefore peroxidase concentration) decreased, the color intensity decreased and later increased again to vanish finally at the highest antibody dilutions. It is proposed that the dilution at which the color intensified can be used as a measure of the sample antibody content; because the quotient (dilution factor of problem sample / dilution factor of reference sample) equals the quotient (antibody concentration in sample / antibody concentration in reference sample), inclusion of a sample of known concentration allows the estimation of the concentration in other samples. This report verifies the validity and precision of the new procedure.
Key words
ELISA, silver, diaminobenzidine, poly(lysine, phenylalanine), antibody measurement.
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