Autores comunican

Vicente López, Argentina (especial para SIIC):
Este estudio fue realizado en el Hospital Dr. Cetrángolo, Laboratorio de Referencia Programa de Control de Tuberculosis, Provincia de Buenos Aires, Argentina.
El objetivo fue determinar en forma económica y rápida la concentración inhibitoria mínima (CIM) de diferentes agentes antimicrobianos frente a Mycobacterium tuberculosis multirresistente (MDR-TB) empleando un método colorimétrico de dilución de drogas en microplaca (M-MTT).^1,2
Fueron estudiados 101 aislamientos clínicos y la cepa de referencia H37Rv. Las drogas utilizadas, colocadas en una placa de cultivo de 96 pocillos y fondo plano, fueron: ácido paraaminosalicílico (PAS), capreomicina (CPM), ethionamida (ETH), amicacina (AMK) y claritromicina (CLA) en concentraciones de 8.0 a 0.25 µg/ml; cicloserina (CS): 60.0 a 1.90 µg/ml; levofloxacina (LX): 4.0 a 0.13 µg/ml); clofazimina (CFZ): 3.0 a 0.10 µg/ml; rifabutina (RBT): 1.0 a 0.13 µg/ml. El colorante vital bromuro de 3-(4,4-di-methylthiazollyl-2-)-2,5 diphenyl tetrazolium (MTT), 5.0 mg/ml, fue utilizado como indicador del crecimiento bacteriano.^3-5 El método de las proporciones (MP) en medio 7H11 de Middlebrook fue empleado como estándar de referencia.⁶ La cepa H37Rv fue ensayada 37 veces para observar desviaciones producidas durante las diferentes determinaciones y obtener un punto (cut-off) para discriminar aislamientos sensibles y resistentes a cada droga. El Microsoft MedCalc 7.0 fue usado para calcular los parámetros estadísticos y farmacocinéticos: media (X), desvío estándar (DE), CIM50 y CIM90. Para cada droga y H37Rv el cut-off en el M-MTT fue calculado según X + 2 DE. El análisis de la curva ROC fue empleado para calcular: sensibilidad (S); especificidad (E), área bajo la curva (AUC) y valores predictivos positivos y negativos (VPP y VPN).^7-9 La curva ROC representa en forma gráfica S versus 1-E para cada concentración ensayada. Aplicada a los valores de CIM en relación con los resultados de sensibilidad del MP identifica un cut-off con la mejor correlación entre S y E. El AUC permite estimar el funcionamiento general de la prueba.^7,8
La mayoría de las drogas mostraron cut-off menores que los hallados para la cepa H37Rv. Todas excepto RBT inhibieron más del 50% de los aislados. El 93.5% fue sensible a CFZ; 91.7% a CPM; 51.5% a CLA; 84.0% a CS; 51.4% a ETH; 71.7% a KM; 87.8% a LX; 82.0% a PAS y 27.7% a RBT. Los valores de CIM con el M-MTT fueron obtenidos en 8 días promedio, correlacionando con los resultados del MP.
Los valores hallados de S y E para los aislamientos clínicos fueron los siguientes: CFZ, 98.9% y 100.0%; CLA, 100.0% y 98.0%; CPM: 90.9% y 100.0%; CS: 100.0% y 100.0%; ETH: 100.0% y 98.0%; KM: 96.6% y 100.0%; LX: 99.0% y 100.0%; PAS: 98.6% y 100.0%; RBT: 100.0% y 100.0%. Los VPP y VPN fueron: CFZ, 100.0% y 99.96%; CLA, 97.31% y 100.0%; CPM, 100.0% y 99.18%; CS, 100.0% y 100.0%; ETH, 97.03% y 99.41%; KM: 100.0% y 98.64%; LX: 100.0% y 99.86%; PAS: 100.0% y 99.70%; RBT: 100.0% y 100.0%, respectivamente. Los valores de AUC obtenidos para cada droga fueron: RBT y CS, 1.000; KM, 0.994; CFZ, 0.992; CLA y PAS: 0.997; ETH, 0.981; CPM, 0.955 y LX, 0.990. En nuestro laboratorio el costo total de la determinación de CIM para 9 drogas fue de U$S 5.0 por aislamiento.
Este ensayo podría ser utilizado en laboratorios clínicos como una alternativa simple, rápida y económica para efectuar screening a drogas de primera línea y evaluar la sensibilidad de aislamientos MDR-TB a varias drogas de segunda línea, con el objeto de orientar futuras conductas terapéuticas.¹⁰

Nora Morcillo

Para dirigir correspondencia a la autora mencionar a SIIC como referencia: 
nora_morcillo@yahoo.com.ar
Italia 1750, 1602, Vicente López, Buenos Aires, Argentina
Fono: 11 47564164; Fax: 11 47561953

Referencias bibliográficas

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Título del artículo en el idioma de la fuente original
A MICROPLATE INDICATOR-BASED METHOD FOR DETERMINING DRUG-SUSCEPTIBILITY OF MULTIDRUG-RESISTANT MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS TO ANTIMICROBIAL AGENTS

Título en castellano
METODO COLORIMETRICO DE MICRODILUCION EN PLACA PARA LA DETERMINACION DE LA SENSIBILIDAD DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS MULTIDROGO RESISTENTE A AGENTES ANTIMICROBIANOS

Autores
Nora Morcillo,¹ Beatriz Di Giulio,² Betriz Testani,³ Mónica Pontino,⁴ Cristina Chirico,⁵ Alberto Dolmann⁶

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