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Autores comunican

Santiago, Chile (especial para SIIC):
En Chile, un país en transición, que avanza hacia el desarrollo, las infecciones entéricas todavía presentan índices elevados de morbilidad, lo que se traduce en tasas de incidencia de diarrea infantil que varían entre 1.3 a 4.5 consultas por 100 000 (Sotomayor, 2000); también son frecuentes los brotes de toxi-infecciones alimentarias con tasas de 3, 4.1 y 5.1 desde 1999 a 2001, respectivamente (Prado y col., 2002). Algunos estudios demostraron que entre los agentes causantes de infecciones entéricas, las diferentes categorías de E. coli diarreogénicas tienen una incidencia importante, sin embargo, existe una subestimación del problema porque no se dispone de técnicas diagnósticas accesibles para el trabajo de rutina (Levine y col., 1993; Levine, 1987).
Se describieron seis categorías de E. coli diarreogénicas que producen síndromes similares y se diferencian por sus factores de virulencia (Nataro y Kaper, 1998). En nuestro país, las de mayor importancia epidemiológica son E. coli enterotoxigénica (ECET), que se caracteriza por la producción de por lo menos uno de los miembros de dos grupos definidos de enterotoxinas lábiles al calor (LT-1 y LT-2) o estables al calor (STa y STb) (Levine, 1987); E. coli enteropatogénica (ECEP), que posee un islote de patogenicidad en donde se codifican una serie de proteínas involucradas en la adhesión y destrucción (A/E) de las microvellosidades intestinales de la célula huésped (Jerse y col., 1990), y E. coli enterohemorrágica (ECEH), que representa en la actualidad uno de los patógenos emergentes de mayor importancia a nivel mundial (Tesh, 1998), cuyos factores de virulencia caracteristicos son la presencia del locus LEE, relacionado con adhesión y destrucción (A/E) de las microvellosidades intestinales de la célula huésped (Jarvis y Kaper, 1996), y la producción de dos citotoxinas denominadas toxinas tipo Shiga (Stx1 y Stx2) (Tesh y O’Brien, 1991).
En Chile, ECEH se asocia al 38% de las diarreas con sangre en niños menores de 5 años y es el principal responsable del síndrome urémico hemolítico, patología cuya incidencia en niños chilenos es similar a lo registrado en países de Norteamérica y Europa (Prado y col., 2002).
El aislamiento en medios selectivos ha sido uno de los métodos presuntivos más utilizados para la detección de E. coli diarreogénicas (Novicki y col., 2000). Por otra parte, los métodos confirmatorios incluyen la detección de genes de virulencia por PCR o hibridación con sondas de DNA (Willshaw y col., 1994; Gannon y col., 1993), ensayos de citotoxicidad (Paton y Paton, 1998) y técnicas inmunoenzimáticas (Law y col., 1994; Li y col., 2000). Dada la importancia epidemiológica de E. coli diarreogénicas se hace necesario contar con protocolos que puedan ser utilizados en la identificación de estos microorganismos en situaciones de riesgo, como brotes de intoxicación por alimentos o infecciones intestinales graves.
Por los antecedentes anteriores nuestro objetivo fue diseñar un método de diagnóstico basado en la técnica de PCR para detectar simultáneamente distintas categorías de E. coli diarreogénicas.

Roberto Vidal *

Referencias bibliográficas

1. Gannon VP, Rashed M, King RK and Golstein EJ. 1993. Detection and characterization of the eae gen of Shiga-like toxin-producing Escherichia coli by using polymerase chain reaction. J Clin Microbiol 31: 1268-1274.
2. Jarvis KG and Kaper JB. 1996. Secretion of extracellular proteins by enterohaemorrhagic Escherichia coli via a putative type III secretion system. Infect. Immun. 64: 4826-4829.
3. Jerse AE, Yu J, Tall BD and Kaper JB. 1990. A genetic locus of enteropathogenic Escherichia coli necessary for the production of attaching and effacing lesions on tissue culture cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 7839-7843.
4. Law D, Hamour AA, Acheson DW, Panigrahi H, Ganguli LA and Denning DW. 1994. Diagnosis of infections with Shiga-like toxin-producing Escherichia coli by use of enzyme-linked immunosorbent assays for Shiga-like toxins on cultured stool samples. J. Med. Microbiol. 40: 241-245.
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15. Willshaw GA, Scotland SM, Smith HR, Cheasty T, Thomas A and Rowe B. 1994. Hybridization of strains of Escherichia coli O157 with probes derived from the eaeA gene of enteropathogenic E. coli and the eaeA homolog from a vero cytotoxin-producing strain of E. coli O157. J. Clin. Microbiol. 32: 897-902.

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Fono: 2 6786646; Fax: 2 7355855
rvidal@med.uchile.cl

MULTIPLEX PCR FOR DIAGNOSIS OF ENTERIC INFECTIONS ASSOCIATED WITH DIARRHEAGENIC Escherichia coli

Título en castellano
PCR MULTIPLEX PARA EL DIAGNOSTICO DE INFECCIONES ENTERICAS ASOCIADO CON Escherichia coli DIARREOGENICAS

Autores
Roberto Vidal,¹ Maricel Vidal,² Rossana Lagos,³ Myron Levine,⁴ Valeria Prado⁵

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