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Bellaterra, España (especial para SIIC):
Una pareja fértil que esté intentando concebir tiene tan sólo 25% de probabilidades de llevar a término un embarazo por cada ciclo menstrual. Ello se debe principalmente a una elevada tasa de muerte embrionaria durante los primeros estadios del desarrollo. Estudios citogenéticos de abortos inducidos muestran que la incidencia de alteraciones cromosómicas disminuye a medida que avanza el desarrollo embrionario.¹ Por lo tanto, el factor más importante que contribuye a esta pérdida embrionaria es la presencia de aneuploidias normalmente letales en estos embriones.
Para aumentar las tasas de implantación y embarazo de determinadas parejas sometidas a un ciclo de fecundación in vitro, se puede aplicar el diagnóstico genético preimplantacional (DGP).² Hasta la actualidad, la técnica más ampliamente utilizada ha sido la hibridación in situ fluorescente (FISH), que permite el análisis de determinados cromosomas para identificar y por lo tanto transferir al útero materno los embriones con una dotación normal de los cromosomas analizados.
Sin embargo, la FISH presenta una limitación técnica importante ya que menos de la mitad de los cromosomas pueden ser analizados³ y por lo tanto algunos embriones anormales son diagnosticados erróneamente como normales.^4,5
Durante la formación del óvulo se obtienen dos células: el primer corpúsculo polar (1CP), sin función reproductiva conocida, y el ovocito en metafase II (MII) que es la célula que podrá ser fecundada por el espermatozoide. Estas dos células tienen dotaciones cromosómicas complementarias. Por ejemplo, si el 1CP tiene una pérdida del cromosoma 21, la MII tendrá un cromosoma 21 extra y viceversa.
La hibridación genómica comparada (CGH) es una técnica de citogenética molecular que, a deferencia de la FISH, permite estudiar ganancias o pérdidas de cualquier cromosoma en una sola célula.^6,7 En nuestro estudio, la CGH se aplicó a un total de 60 células, correspondientes a 30 MII y sus 1CP correspondientes y se determinó el grado de complementariedad entre las parejas 1CP-MII. De esta manera, se evaluó la fiabilidad, sensibilidad y limitaciones de la CGH para poder estudiar la totalidad de cromosomas del 1CP y para utilizarse esta metodología como alternativa a la FISH en el DGP de ovocitos.
Los resultados revelaron que 48% de las parejas MII-1CP presentaban una o más aneuploidias. Es importante destacar que 33% de los ovocitos aneuploides presentaban alteraciones de cromosomas que no se analizan rutinariamente en el DGP con FISH, pero que obviamente habrían limitado la implantación de los embriones derivados de la fecundación de estos ovocitos. El 75% de los ovocitos de mujeres de edad materna avanzada (≥ 37) presentaban alteraciones cromosómicas mientras que sólo un 23% de los ovocitos de mujeres menores de 37 años eran cromosómicamente desequilibrados. El grado de complementariedad detectado entre 1CP y MII fue del 80%, lo que indica que el método es fiable y permite detectar alteraciones de la mayoría de cromosomas. Sólo los cromosomas 17, 19 y 22, así cómo las regiones heterocromáticas no son informativas, tal como fue descrito previamente.^5,8 También se demostró la fiabilidad del método para la detección de segregaciones desequilibradas de translocaciones cromosómicas de origen materno.
Así pues, la aplicación de la CGH en el DGP de aneuploidias y de translocaciones permite seleccionar ovocitos cromosómicamente normales y ayudar así a incrementar las tasas de implantación y embarazo de las pacientes sometidas a un tratamiento por infertilidad.
Agradecimientos: Trabajo financiado por el Ministerio de Sanidad (FIS PI020168) y CIRIT (2001 SGR-00201) y por el Ministerio de Educación, Cultura y Deportes (Cristina M. Gutiérrez tiene una Beca FPU).

Cristina Gutiérrez Mateo *

Referencias bibliográficas

1. Boué A, Boué J, Gropp A. Cytogenetics of pregnancy wastage. Advances in Human Genetics. Vol 14, 1985:1-57.
2. Sermon K, Moutou C, Harper J, Geraedts J, Scriven P, Wilton L et al. ESHRE PGD Consortium data collection IV: May-December 2001. Human Reproduction. Vol 20, 2004:19-34.
3. Abdelhadi I, Colls P, Sandalinas M, Escudero T y Munné S. Preimplantation genetic diagnosis of numerical abnormalities for 13 chromosomes. Reprod Biomed Online. Vol 6, 2003:226-231.
4. Munné S, Magli C, Bahçe M, Fung J, Legator M, Morrison L et al. Preimplantation diagnosis of the aneuploidies most commonly found in spontaneous abortions and live births: XY, 13, 14, 15, 16, 18, 21, 22. Prenatal Diagnosis. Vol 18, 1998:1459-1466.
5. Voullaire L, Wilton L, McBain J, Callaghan T y Williamson R. Chromosome abnormalities identified by comparative genomic hybridization in embryos from women with repeated implantation failure. Molecular Human Reproduction. Vol 8, 2002:1035-1041.
6. Voullaire L, Wilton L, Slater H y Williamson R. Detection of aneuploidy in single cells using comparative genomic hybridization. Prenatal Diagnosis. Vol 19, 1999:846-851.
7. Wells D, Sherlock JK, Handyside AH y Delhanty JDA. Detailed chromosomal and molecular genetic analysis of single cellls by whole genome amplification and comparative genomic hybridisation. Nucleic Acids Research. Vol 27, 1999:1214-1218.
8. Moore D, Pallavicini M, Cher M y Gray J. A t-statistic for objective interpretation of comparative genomic hybridization (CGH) profiles. Cytometry. Vol 28, 1997:183-190.

Para comunicarse con Cristina Gutiérrez Mateo mencionar a SIIC como referencia:
Unitat de Biologia. Facultat de Medicina. Campus Universitari, 08193, Bellaterra, Barcelona, España
Fono: 93 581; Fax: 93 581
cristina.gutierrez@uab.es

RELIABILITY OF COMPARATIVE GENOMIC HYBRIDIZATION TO DETECT CHROMOSOME ABNORMALITIES IN FIRST POLAR BODIES AND METAPHASE II OOCYTES

Título en castellano
FIABILIDAD DE LA HIBRIDACION GENOMICA COMPARADA PARA DETECTAR ALTERACIONES CROMOSOMICAS EN PRIMEROS CORPUSCULOS POLARES Y OVOCITOS EN METAFASE II

Autores
Cristina Gutiérrez Mateo,¹ Dagan Wells,² Jordi Benet,³ Jorge F. Sánchez García,⁴ Mercedes G. Bermúdez,⁵ Itziar Belil,⁶ Josep Egozcue,⁷ Santiago Munné,⁸ Joaquima Navarro⁹

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