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Autores comunican

Valencia, España (especial para SIIC):
La sospecha de que pueden existir variantes en algunos genes que confieran mayor riesgo de cáncer se confirmó con el descubrimiento de la mutación 1100delC del gen chekpoint kinasa en células germinales. CHEK2 es una proteína cinasa implicada en la detención del ciclo celular y que se activa en respuesta al daño en el ADN (CHEK2; OMIM 604373).
La mutación 1100delC en el exón 10 CHEK2 anula la actividad cinasa de CHEK2 y se ha descrito en pacientes con síndrome de Li-Fraumeni (SLF). Recientemente se ha descrito la mayor incidencia del alelo 1100delC en pacientes con historia familiar de cáncer mamario carentes de mutaciones en BRCA1 y BRCA2. La presencia de esta mutación duplica el riesgo de cáncer mamario en mujeres y lo incrementa en 10 veces en varones.
No existen estudios sobre la implicación de la mutación 1100delC CHEK2 en el riesgo de la leucemia de novo y, particularmente, en leucemias o síndromes mielodisplásicos secundarios (LS/SMDS) al tratamiento antineoplásico recibido por una neoplasia anterior. Con el objeto de responder a esta pregunta en el presente estudio se analizaron las mutaciones de 1100delC CHEK2 en un grupo 107 de pacientes con leucemia mieloide aguda, 26 pacientes con LS/SMD y 176 voluntarios sanos.
La detección de 1100delC CHEK2 comprende dos etapas. Se inicia con PCR convencional empleando los cebadores CHEK2F y CHEK2R de Sodha y col. Después se efectúa un segundo PCR en el LightCycler (Roche) a partir de la dilución 1:200 del producto PCR empleando los mismos cebadores del primer PCR, una sonda anchorLC convencional y la sonda sensor delCL específica de la mutación en la que se han sustituido 7 de sus 13 timinas por derivados de ácidos nucleicos bloqueados. El análisis de las curvas de fusión obtenidas tras la PCR permite diferenciar con toda claridad el alelo mutado, que tiene una temperatura de fusión de 54ºC, del alelo silvestre, que tiene una temperatura de fusión de 46ºC.
En ninguna del total de 309 muestras analizadas (LMA + LS/SMDS + controles) se detectó la mutación 1100delC CHEK2 y la buena calidad del ensayo fue confirmada por el empleo sistemático de una muestra control positiva heterozigota en cada uno de ellos.
Los resultados obtenidos coinciden con los de un estudio realizado en pacientes españoles con cáncer de mama familiar en el no se pudo detectar la mutación 1100delC CHEK2 en las 856 muestras analizadas entre casos y controles. Asimismo, en un estudio en la población neoyorquina se detectó una incidencia muy baja para esta mutación (0.3%). Estos resultados hacen que a esta mutación se la pueda considerar como irrelevante en la población española.

María Collado *

Referencias bibliográficas

1. Meijers-Heijboer H, Van den Ouweland A, Klijn J, Wasielewski M, de Snoo A, Oldenburg R, et al. Low-penetrance susceptibility to breast cancer due to CHEK2* 1100delC in noncarriers of BRCA1 or BRCA2 mutations. Nat Genet 2002;31:55–9.
2. Matsuoka S, Huang M, Elledge SJ. Linkage of ATM to cell cycle regulation by the Chk2 by the Chk2 protein kinase. Science 1998;282:1893–7.
3. Vahteristo P, Bartkova J, Eerola H, Syrjäkoski K, Ojala S, Kilpivaara O, et al. A CHEK2 genetic variant contributing to a substantial fraction of familial breast cancer. Am J Hum Genet 2002;71:432–8.
4. Sodha N, Houlston RS, Williams R, Yuille MA, Mangion J, Eeles RA. A robust method for detecting CHEK2/RAD53 mutations in genomic DNA. Human Mutation 2002;19:173–7.

5. Jacobsen N, Bentzen J, Meldgaard M, Jakobsen MH, Fenger M, Kauppinen S, et al. LNA-enhanced detection of single nucleotide polymorphisms in the apolipoprotein E. Nucleic Acid Res 2002; 30:100.
6. Osorio A, Rodríguez-López R, Díez O, de la Hoya M, Martinez JI, Vega A, et al. The breast cancer low-penetrance allele 1100delC in the Chek2 gene is not present in Spanish familial breast cancer population. Int J Cancer 2004;108:54–6.
7. Kenneth O, Heather P, Kirchhoff T, Kolachana P, Rapaport B, Gregersen P, et al. Frequency of CHEK*110C in New York breast cancer cases and controls. BMC Medical Genetics 2003;4:1 (http//www.biomedcentral.com/1471-2350/4/1).

Para comunicarse con María Collado mencionar a SIIC como referencia:
Laboratorio de Biología Molecular, Escuela de Enfermeria 7ª, Hospital Universitario La Fe, Avd. Campa, 46009, Valencia, Valencia, España
Fono: 96 1973351
bolufer_pas@gva.es

Locked nucleic acid-enhanced detection of 1100delC*CHEK2 germ-line mutation in Spanish patients with hematologic malignancies

Título en castellano
Detección de la mutación 1100delC*CHEK2 en hematopatias malignas españolas mediante sondas realzardoras de ácidos nucleicos bloqueados

Autores
María Collado,¹ Olfert Land,² Eva Barragán,³ Pascual Bolufer⁴

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