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APLICACION DE UNA PRUEBA DE ESTRES OXIDATIVO PARA EVALUAR CAPACIDAD FECUNDANTE MASCULINA

El MOST revela los efectos deletéreos que producen los peróxidos grasos sobre la función espermática. Como prueba de resistencia espermática a la lipoperoxidación es objetivo, sencillo y de bajo costo, por lo que reúne condiciones suficientes como para convertirse en una prueba predictora de fertilidad masculina.

* Beatriz Reina Bouvet
describe para SIIC los aspectos relevantes de su trabajo
MODIFIED SPERM STRESS TEST. IMMUNE RESPONSE AND FUNCTIONALLY OF THE SPERM HUMAN MEMBRANE,
recientemente editado en
Archivos Españoles de Urología,
57(5)533-537, 2004

Institución principal de la investigación
* Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Argentina

Rosario, Argentina (especial para SIIC):
Efecto del estrés oxidativo sobre la membrana espermática y la respuesta inmune en semen.
Los espermatozoides contienen en su membrana plasmática alto contenido de ácidos grasos poliinsaturados, por lo que son vulnerables al ataque de las especies reactivas de oxígeno (ROS), cuya acción involucra la peroxidación de los ácidos grasos no saturados produciendo cambios en la fluidez de la misma que alteran profundamente el comportamiento espermático. Si bien la gameta masculina posee sistemas que la protegen de la acción de las ROS, un desequilibrio entre agentes prooxidantes y antioxidantes produce lo que se denomina estrés oxidativo (EO), que puede medirse mediante bioensayos, entre los que se encuentra el test MOST.¹
La integridad y funcionalidad de la membrana plasmática son esenciales para la viabilidad y los cambios fisiológicos necesarios para el proceso de fertilización, los anticuerpos antiespermáticos alteran su permeabilidad afectando la movilidad y la capacidad fértil. Los macrófagos participan en el inicio de la respuesta inmune como célula presentadora de antígenos y en la fase efectora como célula citotóxica, además de sus funciones moduladoras mediante la liberación de citoquinas.
En una población de pacientes infértiles se estudió el estrés oxidativo y su efecto sobre la membrana espermática y la respuesta inmune humoral y celular.
Se trabajó con muestras de semen de 42 pacientes que consultaron por infertilidad en los hospitales escuela de la Universidad Nacional de Rosario (Argentina), Hospital Centenario de Rosario y HEEP en Granadero Baigorria, a los que se efectuó espermograma según normas de la OMS,² y se seleccionaron 25 que no presentaron aglutinación ni hiperviscosidad.
El EO se evaluó con la prueba MOST (modified sperm stress test) midiendo el decaimiento de la movilidad en espermatozoides recuperados de swim-up e incubados durante 4 horas en baño de María a 40°C (MOST = mov. final/mov. inicial). La membrana espermática se estudió con la prueba hipoosmótica (THO) que mide la capacidad de los espermatozoides con membrana anatómica y funcionalmente intacta de incorporar agua, al ser incubados en medio hipoosmótico. La respuesta inmune humoral, anticuerpos antiespermáticos (AAE), se evaluó mediante un método de aglutinación mixta utilizando un kit TAC II elaborado por nuestro equipo de trabajo y validado ante Mar-Screen.³ Para evaluar la respuesta inmune celular se determinó concentración de macrófagos aplicando tinción rojo neutro.
De las 25 muestras seleccionadas, hubo 18 (72%) con MOST anormal (< 0.39): de ellas, 14 (77.7%) presentaban AAE y 10 (55.5%) concentración de macrófagos aumentada (> 600 000/ml de semen); también en 14 (77.7%) muestras el THO estaba alterado (< 60% espermatozoides con colas hinchadas).
La evaluación estadística (chi al cuadrado) reveló asociación estadísticamente significativa entre: concentración de macrófagos aumentada y MOST anormal (p < 0.01); entre THO alterado y MOST anormal (p < 0.02). En todas las muestras que presentaban AAE se hallaron valores de MOST anormal (p < 0.001).
Cuando se interpreta un espermograma para predecir fertilidad potencial la movilidad progresiva es una de las características relevantes. Los mecanismos involucrados en ella son complejos, requieren una estructura espermática adecuada y características metabólicas apropiadas de las gametas. El EO altera la movilidad y la capacidad fecundante.
El MOST revela los efectos deletéreos que producen los peróxidos grasos sobre la función espermática. Como prueba de resistencia espermática a la lipoperoxidación, es objetivo, sencillo y de bajo costo, por lo que reúne condiciones suficientes para convertirse en una prueba predictora de fertilidad masculina.

Beatriz Reina Bouvet *
Referencias bibliográficas
1. Calamera JJ, Doncel GF, Brugo Olmedo S, Kolm P, Acosta AA. (1998) Modified sperm stress test: a simple assay thet predicts sperm-related abnormal in-vitro fertilization. Hum. Reprod.13 (9):2484–88. 2. World Health Organization (1999). WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm cervical-mucus interaction. Cambridge University Press. Cambridge. 3. Gatti V, Solís E, Brufman A y col. (1998) Comparative results of two sperm antibody assay in infertile patients. Validation of a new technique. Acta Urológica Itálica 12 (6):321-323.

Otros artículos de Beatriz Reina Bouvet Solís E, Gatti V, Bouvet B, Brufman A, Provenzal O, Feldman R. - Células redondas en semen e infecciones genitales. Archivos Españoles de Urología (2000) 53(2):101-105. Solís E, Gatti V, Brufman A, Bouvet B, Provenzal O. Ventajas de un nuevo kit para la detección de anticuerpos antiespermáticosArchivos Españoles de Urología (2000) 53(4):363-366. Solís E, Gatti V, Brufman A, Bouvet B y col. Inmunología y deterioro de parámetros seminales en varicocele. Archivos Españoles de Urología (2001) Vol. 54(8):51-54. Solís E, Gatti V, Bouvet B, Brufman A y col. Correlación entre glicolípidos ABH en espermatozoides y tests funcionales. Archivos Españoles de Urología (2001) Vol. 54(3):199-203. Solís EA, Bouvet BR, Brufman AS, Feldman R, Gatti VN. The possible macrophages role in seminal fluid. Actas Urológicas Españolas (Mar 2003) 27(3):185-189. Bouvet BR, Brufman AS, Paparella CV, Feldman RN, Gatti VN, Solís EA. Macrófagos en semen humano. Archivos Españoles de Urología. 2003, 56(9):983-987.

Para comunicarse con Beatriz Reina Bouvet mencionar a SIIC como referencia: Gabriel Carrasco 1854, 2000, Rosario, Santa Fe, Argentina Fono: 341 4302317 beatrizbouvet@infovia.com.ar

Título en castellano
ESTRES ESPERMATICO MODIFICADO. RESPUESTA INMUNE Y FUNCIONALIDAD DE LA MEMBRANA DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO

Autores
Beatriz Reina Bouvet,¹ Cecilia Vicenta Paparella,² Adriana Silvia Brufman,³ Vanda Nora Gatti,⁴ Rodolfo Néstor Feldman,⁵ Edita Amalia Solís⁶

1 Bioquímica, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario, Docente
2 Bioquímica, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario, Docente
3 Bioquímica, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario, Docente
4 Bioquímica, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario, Docente
5 Médico, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Rosario, Docente
6 Bioquímica, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario, Docente