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Crónicas de autores

Bellaterra, España (especial para SIIC):
El valor diagnóstico de los estudios meióticos clásicos ha propiciado su incorporación en algunos de los protocolos de estudio de la infertilidad o esterilidad masculina. Estos estudios proporcionan información de los errores sinápticos que implican la formación de univalentes o bivalentes con reducido número de quiasmas, del comportamiento meiótico de reorganizaciones cromosómicas equilibradas y de la presencia de algunas anomalías meióticas de novo, que en los tres casos pueden reflejarse en un incremento en la producción de espermatozoides cromosómicamente desequilibrados.¹
Con el objetivo de mejorar la caracterización de anomalías meióticas, se diseñó un protocolo secuencial que combina las técnicas citogenéticas clásicas y las de hibridación in situ multiplex (M-FISH).
Se procesaron las muestras de biopsia testicular de tres individuos fértiles y de cuatro individuos oligoastenoteratozoospérmicos (OAT), además de una muestra de eyaculado de un individuo portador de una translocación Robertsoniana t(13;14). Se obtuvieron imágenes de metafases I y metafases II teñidas con Leishman (20%) y se anotaron las coordenadas para facilitar la relocalización posterior. Después de desteñir las preparaciones se les aplicó el protocolo de M-FISH (Spectra Vysion Assay; Vysis Inc.) y se valoraron en un microscopio Olympus BX60 epifluorescente equipado con los filtros adecuados. Todas las imágenes capturadas se analizaron con el Sistema CytoVision (CytoVision 2.7; Applied Imaging).
La técnica permitió la identificación de todos los bivalentes en metafase I y los cromosomas en metafase II. Los tres controles y un paciente con OAT grave mostraron metafases I y II normales. Otro de los individuos infértiles estudiado presentó separación precoz (33%) del bivalente XY en metafase I. Los otros dos pacientes con OAT mostraban múltiples anomalías en algunas metafases, tales como: separación precoz del bivalente sexual, desinapsis parcial del bivalente 15 y 18, y univalencia del bivalente 19, en uno de ellos y separación precoz del bivalente XY, roturas en el bivalente 9, desinapsis de los bivalentes 5, 13, 16, 17 y 18, una reorganización de los cromosomas sexuales en una metafase I y una disomia XY en una metafase II en el otro. Finalmente, se identificó la configuración de los cromosomas reorganizados en el portador de la translocación.
El método secuencial descrito permitió profundizar en el estudio y análisis de las anomalías meióticas. Aunque los resultados preliminares parecen mostrar que las anomalías meióticas afectan indistintamente diferentes bivalentes, sería necesario ampliar el estudio para determinar si es realmente aleatorio. Por otro lado, la identificación de la configuración adoptada por los cromosomas reorganizados puede ayudar a predecir la segregación y las anomalías esperadas para cada una de ellas.

Zaida Sarrate *

Referencias bibliográficas

1. Egozcue J, Blanco J, Anton E, Egozcue S, Sarrate Z, Vidal F. Genetic analysis of sperm and implications of severe male infertility – A review. Placenta. 2003 Oct;24 Suppl B:S62-5.

Para comunicarse con Zaida Sarrate mencionar a SIIC como referencia:
Unitat de Biologia Cellular. Edifici C. Campus Universitari, 08193, Bellaterra, Barcelona, España
Fono: 93 5811112; Fax: 93 5812295
zaida.sarrate@uab.es

IDENTIFICATION OF MEIOTIC ANOMALIES WITH MULTIPLEX FLUORESCENCE IN SITU HYBRIDIZATION: PRELIMINARY RESULTS

Título en castellano
IDENTIFICACION DE ANOMALIAS MEIOTICAS MEDIANTE HIBRIDACION IN SITU MULTIPLEX: RESULTADOS PRELIMINARES

Autores
Zaida Sarrate,¹ Joan Blanco,² Susana Egozcue,³ Francesca Vidal,⁴ Josep Egozcue⁵

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