CARACTERÍSTICAS IMUNOLÓGICAS DAS CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS

Artículo completo
Introdução

As células-tronco mesenquimais (MSCs) são células aderentes ao plástico e morfologicamente semelhantes aos fibroblastos, que apresentam duas características fundamentais: a capacidade de auto-renovação e a de multidiferenciação, sob condições apropriadas.¹ A multipotencialidade das MSCs foi evidenciada em diferentes estudos, onde foi demonstrada a capacidade de diferenciação osteogênica, condrogênica, adipogênica e até neurogênica destas células.^2-5 Devido a estas propriedades especiais, somadas à disponibilidade destas células nos mais variados tecidos, alta capacidade proliferativa, assim como ausência de entraves éticos e legais para sua utilização, as MSCs constituem-se em um dos mais promissores tipos de células-tronco, no que diz respeito à engenharia de tecidos e aplicação das mesmas na prevenção e tratamento de diversas doenças.^6-8
A medula óssea é a principal fonte de MSCs, as quais se situam no estroma deste tecido. Nesta localização, as MSCs fazem parte do microambiente de outra classe importante de células, as células-tronco hematopoiéticas (HSCs), sendo estas as mais bem descritas e estudadas células-tronco até o momento.^1,9 Além da medula óssea, as MSCs foram isoladas de vários outros tecidos, como pâncreas, fígado, córnea, retina, tecido adiposo, cordão umbilical, sangue periférico, intestino e polpa dentária.^2,5,10-12 A presença das MSCs em diversos sítios do organismo sugere que estas células estariam envolvidas no reparo e/ou regeneração dos tecidos ao longo da vida de um indivíduo.¹³
Embora exista uma ampla gama de marcadores positivos descritos para as MSCs, nenhum deles pode ser considerado exclusivo destas células. Por este motivo, características biológicas como aderência ao plástico, expressão de determinados marcadores e capacidade de multidiferenciação são requisitos importantes para que a célula seja considerada uma célula-tronco mesenquimal.¹ Alguns dos marcadores mais freqüentemente expressos por estas células, assim como os que apresentam pouca ou nenhuma expressão, estão listados na Tabela 1.

Vários estudos têm demonstrado a capacidade imunomodulatória das MSCs sobre diferentes células do sistema imune.^18,22-32Esta característica das MSCs apresenta uma grande importância nos estudos sobre a biologia dos transplantes, no tratamento de doenças auto-imunes, assim como na modulação da resposta inflamatória.

Perfil imunológico das MSCs

Quando avaliadas pela citometria de fluxo, as MSCs humanas isoladas da medula óssea apresentam o seguinte fenótipo imunológico: positivas para o complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I, pouquíssima expressão de moléculas do MHC de classe IIe negativas para moléculas co-estimulatórias, como CD40, CD40 ligante, CD80 e CD86.^22,23,27,33 O tratamento das MSCs com a citocina pró-inflamatória interferon gama (IFN-?) é capaz de regular positivamente a expressão de moléculas do MHC de classe I e induzir a expressão de moléculas do MHC de classe II,^22,27,34 mas não consegue modificar a expressão de moléculas co-estimulatórias.^22,27 A avaliação da expressão destas moléculas na presença de IFN-? é interessante, visto que as MSCs podem ser empregadas em sítios no organismo onde há a presença de inflamação e infecção.²⁷

A expressão de MHC de classe I pelas MSCs as protegem de mecanismos deletérios por parte das células natural killer (NK). As células NK destroem as células que apresentam pouca ou nenhuma expressão destas moléculas, como por exemplo, as células tumorais e as infectadas por vírus.³³
Quando as MSCs são induzidas a diferenciar-se nas linhagens adipogênica, osteogênica e condrogênica, as mesmas expressam moléculas do MHC de classe I, mas não moléculas do MHC de classe II. Após o tratamento com IFN-? por 48 horas, foi observado um pequeno aumento na expressão de MHC de classe II nas células diferenciadas na linhagem condrogênica, nenhuma expressão destas moléculas na linhagem adipogênica, e até uma diminuição de MHC de classe II em células diferenciadas na linhagem osteogênica, quando comparadas com as MSCs indiferenciadas.³⁴

Este fenótipo observado para as MSCs, tanto indiferenciadas como diferenciadas nas linhagens adipogênica, osteogênica e condrogênica, é considerado não imunogênico e sugere que estas células podem induzir a tolerância. As moléculas do MHC de classe I podem ativar células T alorreativas, mas na ausência de moléculas co-estimulatórias, o segundo sinal não seria ativado, levando à anergia destas células T.³
Capacidade imunomodulatória das MSCs

Normalmente, células alogênicas são destruídas pelo sistema imunológico do hospedeiro. Uma grande surpresa para os imunologistas foi justamente a observação de que as MSCs não obedecem a essas “regras” de rejeição. Além de não serem percebidas como aloantígenos, as MSCs podem suprimir a ativação e proliferação de diferentes células do sistema imunológico do hospedeiro,^{22,28,29,31,35}como ilustra a Figura 1.

Células dendríticas

Alguns estudos indicam que as MSCs podem interferir na diferenciação, maturação e função das células dendríticas,^25,30,35 as quais são as mais eficientes células apresentadoras de antígenos profissionais (APCs) do organismo, desempenhando um papel crucial no direcionamento das respostas celular e humoral contra antígenos próprios e não-próprios.³⁶ Tanto as MSCs como o seu sobrenadante podem alterar a capacidade de endocitose das células dendríticas, assim como afetar a habilidade destas células de estimular a proliferação de células T alorreativas.²⁵Uma inibição de moléculas relacionadas à apresentação antigênica, como CD1a, CD40, CD83, CD80, CD86 e HLA-DR, foi observada durante a maturação das células dendríticas na presença das MSCs.²⁵ Esses resultados vão de encontro aos observados em outros estudos, onde as MSCs impediram a diferenciação de monócitos do sangue periférico em células dendríticas.^30,37 O perfil de citocinas secretadas pelas células dendríticas pode ser modificado pelas MSCs, estimulando a secreção de citocinas regulatórias, como a interleucina 10 (IL-10), e inibindo a secreção de fator de necrose tumoral (TNF) e interleucina 12 (IL-12), ambas citocinas pró-inflamatórias.¹⁸

Células T

Evidências mostram que quando as MSCs são cultivadas em culturas mistas de linfócitos, a proliferação de células T é suprimida.^{22,27,34,38,39} Esta capacidade de imunossupressão apresentada pelas MSCs foi demonstrada em células-tronco de diferentes espécies, como humanas,^22,23,39 murinas⁴⁰ e de primatas.⁴¹ O grau de supressão exercido pelas MSCs é dose-dependente, pois quando maiores concentrações das células-tronco são adicionadas na cultura de células, a inibição é mais pronunciada.^38,39 Alguns autores sugerem que a supressão da alorreatividade pelas MSCs é MHC independente, visto que os resultados foram similares quando foram utilizadas MSCs autólogas ou alogênicas.³⁹

As MSCs alogênicas não foram capazes de induzir a proliferação de células T, mesmo quando o meio era enriquecido com IFN-? (uma potente citocina pró-inflamatória) ou quando as MSCs eram transfectadas com moléculas co-estimulatórias. De maneira contrária, as células T responderam vigorosamente a células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). Citocinas importantes na função de APCs, como a interleucina 1? (IL-1?), interleucina 1? (IL-1?) e TNF, foram ineficazes em gerar respostas proliferativas das células T em relação às MSCs. Este fato pode ser atribuído a mecanismos supressores ativos das MSCs sobre a proliferação das células T, mais do que à falta de imunogenicidade ou à indução de tolerancia.²⁷
As MSCs interferem na diferenciação de células TCD4⁺ em linfócitos T auxiliares. Na presença das MSCs, as células T auxiliares do tipo Th1 diminuem em 50% a produção de IFN-?, quando comparadas com culturas sem a presença das células-tronco. Inversamente, as células do tipo Th2, quando co-cultivadas com as MSCs, mostram um aumento significativo na produção de interleucina 4 (IL-4). Estes resultados indicam que as MSCs exercem um papel regulatório e antiinflamatório, direcionando o perfil de citocinas produzido por estas células.¹⁸
Os linfócitos T citolíticos (CTLs) são capazes de provocar a lise de células alogênicas após o reconhecimento do antígeno via MHC de classe I.³⁶ Quando as MSCs são adicionadas em culturas mistas de linfócitos nas fases iniciais de ativação, conseguem inibir a lise de células-alvo pelos CTLs. Entretanto, nenhuma inibição pode ser observada quando as MSCs são adicionadas na fase citotóxica destas células. Os CTLs não foram capazes de destruir as MSCs, indicando que estas células conseguem escapar do reconhecimento antigênico pelos linfócitos TCD8⁺.⁴²

As MSCs diferenciadas em adipócitos, osteoblastos e condrócitos mantêm a capacidade de inibir a proliferação de células T em culturas mistas de linfócitos.³⁴ Inclusive, a diferenciação osteogênica aumenta o efeito supressor das MSCs sobre as células T. Mesmo após o tratamento das MSCs diferenciadas (na linhagem osteogênica) com IFN-?, não foi observada uma resposta proliferativa das células T quando as duas populações celulares eram co-cultivadas.²⁷

Células B

As MSCs apresentam um efeito inibitório sobre a proliferação das células B,^28,31,43 assim como são capazes de suprimir a diferenciação terminal destas células em plasmócitos secretores de anticorpos.^28,31 Ainda, inibem as propriedades quimiotáxicas das células B, visto que as quimiocinas CXCR4, CXCR5, CXCL12 e CXCR4 ligante são negativamente reguladas na presença das MSCs.²⁸
O efeito supressor das MSCs sobre a função das células B também foi avaliado in vivo. O sobrenadante da cultura de MSCs foi capaz de suprimir a secreção dos anticorpos IgM e IgG1 em camundongos imunizados com antígenos T-dependentes e T-independentes.³¹ Estes resultados confirmam os encontrados anteriormente em estudos in vitro, onde a adição de MSCs à cultura mista de linfócitos⁴⁴ ou a co-cultura de MSCs e células B purificadas do sangue periférico²⁸ suprimiu a produção dos anticorpos IgM, IgG e IgA.

Células NK

As células NK, as quais são consideradas as principais células efetoras da imunidade inata, também são influenciadas pelo potencial imunomodulatório das MSCs. A presença de MSCs em culturas de células NK estimuladas por interleucina 2 (IL-2) conseguiu diminuir significativamente a quantidade de IFN-? produzido por estas células.¹⁸ Além disso, quando co-cultivadas com as MSCs, as células NK perdem a expressão de receptores de ativação na sua superfície, como NKp30 e NKp44. Da mesma forma, uma marcada diminuição na sua capacidade citolítica é observada.²⁹

Mecanismos imunossupressores das MSCs

Embora os dados apresentados em diversos estudos sugiram que o uso de MSCs em terapias regenerativas pode ser bem sucedido, os mecanismos pelos quais estas células não são rejeitadas pelo sistema imune do hospedeiro ainda precisam ser melhor comprendidos.³³Foram sugeridos alguns possíveis mecanismos, como a produção de um microambiente imunossupressor pelas MSCs, a capacidade de imunomodulação do fenótipo das células imunes por estas células e, por fim, a ausência de imunogenicidade das mesmas. Possivelmente, estes mecanismos estão inter-relacionados e envolvem tanto o contato direto entre as células como mecanismos indiretos, através da produção e liberação de fatores solúveis, como as citocinas.³³
O envolvimento de moléculas solúveis na atividade supressora das MSCs sobre células T foi demonstrado em um estudo onde células TCD4⁺ e TCD8⁺ eram co-cultivadas com MSCs, mas separadas por uma membrana transwell. Apesar das células não estarem em contato direto, devido à presença da membrana, foi observada uma redução da proliferação das células T.²³ Resultados semelhantes foram encontrados por outros autores, evidenciando o efeito imunossupressor das MSCs sobre as células T²⁷ e células B³¹ mesmo na presença da membrana, indicando que o contato célula-célula não é essencial. A IL-10, o fator de crescimento transformador beta (TGF-?), o fator de crescimento hematopoiético (HGF), a prostaglandina E2 (PGE₂), a indoleamina 2,3-dioxigenase (IDO) e o óxido nítrico (NO), foram algumas destas moléculas associadas ao efeito imunossupressor das MSCs.^{18,23,33,45-47}
Outra importante molécula solúvel envolvida na regulação imune observada nas MSCs é a HLA-G5. A HLA-G é uma molécula não-clássica do antígeno leucocitário humano (HLA) de classe I, que protege o feto contra a rejeição mediada pelas células do sistema imunológico da mãe.⁴⁸ A isoforma HLA-G5, secretada pelas MSCs após o contato com células T aloestimuladas, seria responsável pelas propriedades imunomodulatórias destas células, impedindo a proliferação de células T alogênicas e induzindo a expansão de células T regulatórias (Tregs) CD4⁺CD25^highFOXP3⁺. Em relação à imunidade inata, a HLA-G5 é capaz de inibir a citólise das MSCs mediada pelas células NK, assim como a secreção de IFN-? por estas células.⁴⁹
Já para Krampera e col., o efeito inibitório das MSCs sobre as células T se deve exclusivamente ao contato direto entre os dois tipos celulares, onde as MSCs impediriam fisicamente o contato entre os linfócitos T e APCs, dificultando a apresentação antigênica e, conseqüentemente, impedindo a ativação e proliferação das células T.³⁸
Embora vários estudos tenham identificado diferentes fatores solúveis como possíveis mecanismos imunomodulatórios das MSCs, o bloqueio de qualquer uma destas moléculas isoladamente não resulta em uma perda completa da capacidade imunossupressora das MSCs, sugerindo que a regulação imune por estas células seja um fenômeno complexo, onde diferentes mecanismos agem sinergicamente.⁵⁰

As células Tregs exercem uma função importante na indução da tolerância periférica e na inibição de respostas imunes pró-inflamatórias.³² Esta população especializada de células suprime a ativação do sistema imune, mantendo a homeostase e a tolerância a antígenos próprios.¹⁸ Foi sugerido que as MSCs exercem a sua atividade imunossupressora induzindo um aumento do número de células Tregs CD4⁺CD25⁺na população alvo.¹⁸ As MSCs, além de promoverem a expansão significativa destas células, aumentam a capacidade inibitória das mesmas.³²

Uso terapêutico das MSCs

A natureza imunossupressora das MSCs é de grande relevância clínica em relação aos transplantes alogênicos, pois esta população de células poderia, teoricamente, reduzir a incidência e a severidade da doença do enxerto-versus-hospedeiro (DEvH).³⁹ A DEvH aguda severa é uma grave complicação que pode ocorrer após o transplante alogênico de HSCs. A observação de que as MSCs induzem a inibição de culturas mistas de linfócitos e células T, independentemente do MHC, pode ter implicações clínicas importantes.
Le Blanc e col. relataram uma surpreendente melhora no quadro clínico de um menino com DEvH aguda severa no fígado e intestino, resistente ao tratamento, após tratamento com MSCs alogênicas. O paciente apresentava diarréia até 20 vezes ao dia e uma alta concentração de bilirrubina. Quatro dias após a infusão endovenosa com as MSCs (2 x 10⁶ por kg de peso), a freqüência da diarréia passou a ser de duas vezes ao dia e houve uma redução na concentração de bilirrubina.⁶

Em um estudo experimental de fase II que incluiu 55 pacientes com DEvH aguda severa, graus III e IV, resistente a esteróides, foi observada uma resposta completa em 30 pacientes e uma resposta parcial em nove, após a infusão com MSCs alogênicas isoladas da medula óssea (1.4 x 10⁶ por kg de peso). A sobrevida dos pacientes com resposta completa foi significantemente maior do que a daqueles com resposta parcial ou sem resposta ao tratamento com as MSCs.⁵¹
Vários estudos mostraram que as MSCs contribuem para o reparo tecidual e que poderiam ser empregadas para a regeneração de diferentes tecidos do organismo. MSCs alogênicas murinas injetadas diretamente sobre o miocárdio infartado ou administradas pela via endovenosa dos animais foram capazes de migrar para o local da lesão, assim como prevenir a remodelação deletéria do tecido cardíaco.⁷ Em um modelo experimental de distrofia muscular de Duchenne em camundongos, MSCs humanas isoladas da membrana sinovial promoveram o reparo do tecido muscular esquelético.⁵² Da mesma forma, o transplante de células-tronco da polpa de dentes decíduos humanos esfoliados (SHEDs), associadas à hidroxiapatita e ao fosfato tricálcio, em defeitos ósseos produzidos na calota craniana de camundongos, induziram a reparação dos defeitos com significante formação óssea local.⁵³

A osteogênese imperfeita (OI) é uma desordem hereditária grave, causada por uma deficiência na produção de colágeno do tipo I, levando o indivíduo a apresentar sintomas como fragilidade óssea e deficiência no crescimento.⁵⁴ Horwitz e col. observaram um aumento significativo na estatura, assim como na mineralização óssea em cinco crianças portadoras de OI, após o transplante de medula óssea alogênico entre irmãos HLA-compatíveis.⁵⁵ Em outro estudo, foi observada uma aceleração na velocidade do crescimento em seis crianças portadoras de OI, após infusão de MSCs purificadas da medula óssea.⁵⁶ Estes estudos indicam que o uso das MSCs nos casos de OI pode representar uma nova e promissora abordagem para o tratamento desta grave condição.
A capacidade imunomodulatória das MSCs também tem sido utilizada para o desenvolvimento de terapias para o tratamento de doenças auto-imunes.⁵⁰ Em um modelo de artrite reumatóide induzida em camundongos, a infusão sistêmica de MSCs isoladas de tecido adiposo humano reduziu significativamente a severidade da doença. As MSCs reduziram a expansão de células Th1/Th17 antígeno específicas e induziram a produção de IL-10 nas articulações e linfonodos. Ainda, foi observada a geração de células Tregs CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺ capazes de suprimir a resposta de linfócitos T auto-reativos.⁵⁷ Em relação à diabetes auto-imune tipo I, MSCs alogênicas murinas retardaram o aparecimento da doença em camundongos NOD pré-diabéticos, promovendo uma mudança em direção ao perfil Th2 da resposta imunológica.⁵⁸

Considerações finais

As propriedades imunomodulatórias das células-tronco mesenquimais, a capacidade de multidiferenciação e de regeneração de tecidos danificados, sugerem que estas células apresentam um grande potencial de uso na engenharia de tecidos e na imunoterapia.
Entretanto, estudos bem delineados in vivo a respeito da imunogenicidade, dos mecanismos envolvidos na capacidade imunomodulatória e na diferenciação das células-tronco mesenquimais, assim como a segurança de uso destas células a longo prazo, são essenciais para que se possa aplicar as terapias baseadas em células-tronco com eficácia e de forma segura no tratamento de inúmeras doenças.

Bibliografía del artículo
1. Bydlowski SP, Debes AA, Maselli LMF, Janz FL. Características biológicas das células-tronco mesenquimais. Rev Bras Hematol Hemoter 31(suppl 1):25-35, 2009.
2. Miura M, Gronthos S, Zhao M, Fisher LW, Robey PG, Shi S. SHED: Stem cells from human exfoliated deciduous teeth. Proc Natl Acad Sci USA 100(10):5807-12, 2003.
3. Javazon EH, Beggs KJ, Flake AW. Mesenchymal stem cells: paradoxes of passaging. Exp Hematol 32(5):414-25, 2004.
4. Krampera M, Pasini A, Pizzolo G, Cosmi L, Romagnani S, Annunziato F. Regenerative and immunomodulatory potential of mesenchymal stem cells. Curr Opi Pharmacol 6(4):435-41, 2006.
5. Krampera M, Marconi S, Pasini A e col. Induction of neural-like differentiation in human mesenchymal stem cells derived from bone marrow, fat, spleen and thymus. Bone 40(2):382-90, 2007.
6. Le Blanc K, Rasmusson I, Sundberg B e col. Treatment of severe acute graft-versus-host disease with third party haploidentical mesenchymal stem cells. Lancet 363(12):1439-41, 2004.
7. Pittenger MF, Martin BJ. Mesenchymal stem cells and their potential as cardiac therapeutics. Circ Res 95(1):9-20, 2004.
8. Da Silva Meirelles L, Caplan AI, Nardi NB. In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells. Stem Cells 26(9):2287-99, 2008.
9. Bobis S, Jarocha D, Majka M. Mesenchymal stem cells: characteristics and clinical applications. Folia Histochem Cytobiol 44(4):215-30, 2006.
10. Gronthos S, Mankani M, Brahim J, Robey G, Shi S. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci USA 97(25):13625-30, 2000.
11. Roufosse CA, Direkze NC, Otto WR, Wrigth NA. Circulating mesenchymal stem cells. Int J Biochem Cell Biol 36(4):585-97, 2004.
12. Nadig RR. Stem Cell therapy - Hype or hope? A review. J Conserv Dent 12(4):131-8, 2009.
13. Cai J, Weiss ML, Rao MS. In search of "stemness". Exp Hematol 32(7):585-98, 2004.
14. Shi S, Gronthos S. Perivascular niche of postnatal mesenchymal stem cells in human bone marrow and dental pulp. J Bone Miner Res 18(4):696-704, 2003.
15. Uccelli A, Moretta L, Pistoia V. Mesenchymal stem cells in health and disease. Nat Rev Immunol 8(9):726-36, 2008.
16. Izadpanah R, Trygg C, Patel B e col. Biologic properties of mesenchymal stem cells derived from bone marrow and adipose tissue. J Cell Biochem 99(5):1285-97, 2006.
17. Govindasamy V, Ronald VS, Totey S e col. Micromanipulation of culture niche permits long-term expansion of dental pulp stem cells - and economic and commercial angle. In Vitro Cell Dev Biol Anim 46(9):764-73, 2010.
18. Aggarwal S, Pittenger MF. Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell responses. Blood 105(4):1815-22, 2005.
19. Conget PA, Minguell JJ. Phenotypical and functional properties of human bone marrow mesenchymal progenitor cells. J Cell Physiol 181(1):67-73, 1999.
20. Anjos-Afonso F, Bonnet D. Nonhematopoietic/endothelial SSEA-1+ cells define the most primitive progenitors in the adult murine bone marrow mesenchymal compartment. Blood 109(1):1298-306, 2007.
21. Gang EJ, Bosnakovski D, Figueiredo CA, Visser JW, Perlingeiro RCR. SSEA-4 identifies mesenchymal stem cells from bone marrow. Blood 109(15):1743-51, 2007.
22. Tse WT, Pendleton JD, Egalka MC, Guinan EC. Suppression of allogeneic T-cell proliferation by human marrow stromal cells: implications in transplantation. Transplantation 75(3):389-97, 2003.
23. DiNicola M, Carlo-Stella C, Magni M e col. Human bone marrow stromal cells suppress T-lymphocyte proliferation induced by cellular or nonspecific mitogenic stimuli. Blood 99(10):3838-43, 2002.
24. Le Blanc K. Immunomodulatory effects of fetal and adult mesenchymal stem cells. Cytotherapy 5(6):485-9, 2003.
25. Zhang W, Ge W, Li C e col. Effects of mesenchymal stem cells on differentiation, maturation and function of human monocyte-derived dendritic cells. Stem Cells Dev 13(3):263-71, 2004.
26. Glennie S, Soeiro I, Dyson PJ, Lam EW, Dazzi F. Bone marrow mesenchymal stem cells induce division arrest anergy of activated T cells. Blood 105(7):2821-7, 2005.
27. Klyushnenkova E, Mosca JD, Zernetkina V e col. T cell responses to allogeneic human mesenchymal stem cells: immunogenicity, tolerance, and suppression. J Biomed Sci 12(1):47-57, 2005.
28. Corcione A, Benvenuto F, Ferretti E e col. Human mesenchymal stem cells modulate B-cell functions. Blood 107(1):367-72, 2006.
29. Spaggiari GM, Capobianco A, Abdelrazik H, Becchetti F, Mingari MC, Moretta L. Mesenchymal stem cells inhibit natural killer-cell proliferation, cytotoxicity, and cytokine production: role of indoleamine 2,3-dioxygenase and prostaglandin E2. Blood 111(3):1327-33, 2008.
30. Spaggiari GM, Abdelrazik H, Becchetti F, Moretta L. MSCs inhibit monocyte-derived DC maturation and function by selectively interfering with the generation of immature DCs: central role of MSC-derived prostaglandin E2. Blood 113(26):6576-83, 2009.
31. Asari S, Itakura S, Ferreri K e col. Mesenchymal stem cells suppress B-cell terminal differentiation. Exp Hematol 37(5):604-15, 2009.
32. Tolar J, Hippen KL, Blazar BR. Immune regulatory cells in umbilical cord blood: T regulatory cells and mesenchymal stromal cells. Br J Haematol 147(2):200-6, 2009.
33. Ryan JM, Barry FP, Murphy JM, Mahon BP. Mesenchymal stem cells avoid allogeneic rejection. J Inflamm (Lond) 2:8, 2005.
34. Le Blanc K, Tammik C, Rosendahl, Zetterberg, Ringén O. HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells. Exp Hematol 31(10):890-6, 2003.
35. Jiang XX, Zhang Y, Liu B, Zhang SX, Wu Y, Yu XD, Mao N. Human mesenchymal stem cells inhibit differentiation and function of monocyte-derived dendritic cells. Blood 105(10):4120-6, 2005.
36. Abbas AK, Lichtman AH, Pillai S. Cellular and molecular immunology. 6th ed. Philadelphia: Elsevier; 2007. 566 pp.
37. Nauta AJ, Kruisselbrink AB, Lurvink E, Willemze R, Fibbe WE. Mesenchymal stem cells inhibit generation and function of both CD34+-derived and monocyte-derived dendritic cells. J Immunol 177(4):2080-7, 2006.
38. Krampera M, Glennie S, Dyson J, Scott D, Laylor R, Simpson E, Dazzi F. Bone marrow mesenchymal stem cells inhibit the response of naive and memory antigen-specific T cells to their cognate peptide. Blood 101(9):3722-9, 2003.
39. Le Blanc K, Tammik L, Sundberg B, Haynesworth SE, Ringdén O. Mesenchymal stem cells inhibit and stimulate mixed lymphocyte cultures and mitogenic responses independently of the major histocompatibility complex. Scand J Immunol 57(1):11-20, 2003.
40. Djouad F, Plence P, Bony C e col. Immunosuppressive effect of mesenchymal stem cells favors tumor growth in allogeneic animals. Blood 102(10):3837-44, 2003.
41. Bartholomew A, Sturgeon C, Siatskas M e col. Mesenchymal stem cells suppress lymphocyte proliferation in vitro and prolong skin graft survival in vivo. Exp Hematol 30(1):42-8, 2002.
42. Rasmusson I, Ringdén O, Sundberg B, Le Blanc K. Mesenchymal stem cells inhibit the formation of cytotoxic T lymphocytes, but not activated cytotoxic T lymphocytes or natural killer cells. Transplantation 76(8):1208-13, 2003.
43. Augello A, Tasso R, Negrini SM e col. Bone marrow mesenchymal progenitor cells inhibit lymphocyte proliferation by activation of the programmed death 1 pathway. Eur J Immunol 35(5):1482-90, 2005.
44. Comoli P, Ginevri, Maccario R e col. Human mesenchymal stem cells inhibit antibody production induced in vitro by allostimulation. Nephrol Dial Transplant 23(4):1196-202, 2008.
45. Meisel R, Zibert A, Laryea M, Göbel U, Däubener W, Dillo D. Human bone marrow stromal cells inhibit allogeneic T-cells responses by indoleamine 2,3-dioxygenase-mediated tryptophan degradation. Blood 103(12):4619-21, 2004.
46. Sato K, Ozaki, Oh I e col. Nitric oxide plays a critical role in suppression of T-cell proliferation by mesenchymal stem cells. Blood 109(1):228-34, 2007.
47. Patel SA, Meyer JR, Greco SJ, Corcoran KE, Bryan M, Rameshwar P. Mesenchymal stem cells protect breast cancer cells through regulatory T cells: role of mesenchymal stem cell-derived TGF-beta. J Immunol 184(10):5885-94, 2010.
48. Hunt JS, Petroff MG, Morales P, Sedlmayr P, Geraghty DE, Ober C. HLA-G in reproduction: studies on the maternal-fetal interface. Hum Immunol 61(11):1113-7, 2000.
49. Selmani Z, Naji A, Zidi I e col. Human leukocyte antigen-G5 secretion by human mesenchymal stem cells is required to suppress T lymphocyte and natural killer function and to induce CD4+CD25highFOXP3+ regulatory T cells. Stem Cells 26(1):212-22, 2008.
50. Bassi EJ, Aita CAM, Câmara NOS. Immune regulatory properties of multipotent mesenchymal stromal cells: Where do we stand? World J Stem Cells 3(1):1-8, 2011.
51. Le Blanc K, Frassoni F, Ball L e col. Mesenchymal stem cells for treatment of steroid-resistant, severe, acute graft-versus-host disease: a phase II study. Lancet 371(9624):1579-86, 2008.
52. De Bari C, Dell' Accio F, Vandenabeele F, Vermeesch JR, Raymackers JM, Luyten FP. Skeletal muscle repair by adult human mesenchymal stem cells from synovial membrane. J Cell Biol 160(6):909-18, 2003.
53. Seo BM, Sonoyama W, Yamaza T e col. SHED repair critical-size calvarial defects in mice. Oral Dis 14(5):428-34, 2008.
54. Rios D, Vieira ALF, Tenuda LMA, Machado MAAM. Osteogenesis imperfecta and dentinogenesis imperfecta: associated disorders. Quintessence Int 36(9):695-701, 2005.
55. Horwitz EM, Prockop DJ, Gordon PL e col. Clinical responses to bone marrow transplantation in children with severe osteogenesis imperfecta. Blood 97(5):1227-31, 2001.
56. Horwitz EM, Gordon PL, Koo WKK e col. Isolated allogeneic bone marrow-derived mesenchymal cells engraft and stimulate growth in children with osteogenesis imperfecta: Implications for cell therapy of bone. Proc Natl Acad Sci USA 99(13):8932-7, 2002. 57. González MA, Gonzalez-Rey E, Rico L, Büscher D, Delgado M. Treatment of experimental arthritis by inducing immune tolerance with human adipose-derived mesenchymal stem cells. Arthritis Rheum 60(4):1006-19, 2009.
58. Fiorina P, Jurewicz M, Augello A e col. Immunomodulatory function of bone marrow-derived mesenchymal stem cells in experimental autoimmune type 1 diabetes. J Immunol 183(2):993-1004, 2009.