DESCRIBEN NUEVAS MUTACIONES EN FAMILIAS CON PARAPLEJIA ESPASTICA HEREDITARIA

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Las paraplejías espásticas hereditarias (PEH) son trastornos neurodegenerativos caracterizados por debilidad progresiva y espasticidad de los miembros inferiores. Los síndromes de PEH se clasifican desde el punto de vista clínico como puros o complicados, de acuerdo con la presencia o ausencia de síntomas neurológicos adicionales.¹ Las formas autosómica dominante (AD), autosómica recesiva (AR) y ligada a X son genéticamente heterogéneas. Hasta la fecha, se identificaron 33 locus diferentes vinculados a la PEH (tabla 1) y se logró la clonación de 13 genes responsables (HUGO Gene Nomenclature Committee, www.gene.ucl.ac.uk/cgi-bin/nomenclature/).² Muy recientemente, se localizó un nuevo locus para la PEHAR con cuerpo calloso delgado (CCD) en el cromosoma 8p12-p11.21.³ La PEHAD es la variedad más frecuente, responsable de aproximadamente el 40% de los casos, y se debe a mutaciones en el gen SPG4 (2p21-p24), el cual codifica la espastina, una proteína que pertenece a la familia AAA (ATPasas asociadas con diversas actividades celulares).⁴ Se identificaron otros siete genes causales de PEHAD: SPG3A (14q11.2-q24.3), SPG6 (15q11.1), SPG10 (12q13), SPG13 (2q24-q34), SPG17 (11q12-q14), SPG31 (2p12) y SPG33 (10q24.2).^5-12 SPG3A codifica información para la síntesis de atlastina, proteína que contiene sitios de unión para GTPasa y dominios funcionales para hidrólisis.⁵ Las formas clínicas vinculadas a este último gen representan aproximadamente el 10% de las PEHAD y son más prevalentes en familias en las cuales la enfermedad comienza en la infancia. SPG6, también llamado NIPA1 (non-imprinted gene in Prader-Willi syndrome/Angelman syndrome chromosome region 1), codifica una proteína de membrana con función desconocida.⁶ La enfermedad asociada a SPG6 representa una de las formas de PEHAD no complicada más graves, con inicio durante la adolescencia o la edad adulta y lenta progresión. La PEH vinculada con SPG10 se asocia con mutaciones en el gen KIF5A (para la cadena pesada de cinesina), el cual codifica una proteína que participa en el transporte de organelas y macromoléculas y en el pasaje a través de la membrana. Los individuos con mutaciones en KIF5A presentan PEH no complicada o combinada con atrofia muscular distal.⁷ La PEHAD asociada con SPG13, una variante pura de la enfermedad, se asocia con una mutación en el gen HSP60, que codifica la chaperona mitocondrial en Hsp60.⁸ Se identificaron mutaciones en el gen BSCL2 en familias con PEH vinculada a SPG17, tipo síndrome de Silver, una forma complicada del trastorno, con notable debilidad y atrofia de los músculos de las manos y, en algunos casos, de los pies.⁹ El gen BSCL2, que codifica la proteína seipina, se consideró originalmente responsable de la lipodistrofia congénita de Berardinelli-Seip, una enfermedad autosómica recesiva.¹⁰ Muy recientemente se identificaron diferentes mutaciones en el gen REEP1 (receptor expression-enhancing protein 1) en seis familias con SPG31¹¹ y en una familia alemana con PEHAD se notificó una mutación del gen ZFYVE27 (SPG33).¹² REEP1 pertenece a una nueva familia de proteínas mitocondriales, mientras que ZFYVE27, miembro reciente de la familia de proteínas FYVE-finger, es una proteína que interactúa con la espastina.

A continuación presentamos una revisión actualizada de nuestro estudio clínico y genético en familias con PEHAD. Fue analizado un total de 59 probandos de familias sin parentesco, con distinto origen étnico: 50 pacientes originarios de Europa, 6 familias de EE.UU., 1 familia de Sudamérica y 2 familias de Japón, todos ellos con diagnóstico de PEHAD. El análisis de secuencia del gen SPG4 reveló tres nuevas mutaciones y una mutación missense que ya había sido informada previamente en la lituratura (p.R562Q).¹³ Se identificó una nueva mutación missense en el exón 17 de SPG4 (p.T614I) en una numerosa familia italiana que presentó una forma diferente de PEH, con quistes aracnoideos congénitos, heredados de manera autosómica dominante.¹⁴ Dieciséis miembros de esa familia estaban clínicamente afectados. Tal forma de PEH se asoció con pie cavo y las imágenes de resonancia magnética nuclear (RMN) de cerebro mostraron quistes aracnoideos en el ángulo pontocerebeloso, no complicados, en todos los pacientes. En algunos sujetos se detectaron características clínicas adicionales: el retraso mental estaba presente en 6 individuos afectados, se observó epilepsia en un paciente y otra persona mostró trastornos urinarios. En esta familia, la edad de comienzo de la enfermedad varió ampliamente, con notable diferencia entre los padres y los hijos, lo cual sugirió la presencia de anticipación genética. La asociación de la paraparesia espástica con los quistes aracnoideos congénitos puede ser explicada por la mutación p.T614I en SPG4, ya que la mutación de la espastina podría alterar la interacción con otras proteínas involucradas en el desarrollo del sistema nervioso central, lo que originaría los quistes mencionados. Otra hipótesis para explicar este fenotipo único podría ser la asociación del locus SPG4 con otro que determine los quistes aracnoideos congénitos.

Se identificó una nueva mutación del marco de lectura (frameshift mutation) en SPG4 (c.906delT), en el exón 6, en otra familia italiana, 11 de cuyos miembros estaban afectados por PEHAD.¹⁵ En esa familia hubo variación fenotípica intrafamiliar en lo referente a edad de inicio de la espasticidad, progresión de la enfermedad y rasgos clínicos adicionales, como neuropatía periférica sensitivo-motora, alteraciones cognitivas y disfunción urinaria. Los varones afectados presentaron síntomas más tardíamente en comparación con las mujeres, pero mostraron progresión más rápida de la enfermedad. Se detectó deterioro cognitivo en los seis varones afectados, no así en las mujeres enfermas. Características clínicas adicionales, como la disminución de la sensibilidad vibratoria en los miembros inferiores y pie cavo, fueron notificadas en estas últimas, mientras que los problemas urinarios se observaron principalmente en los enfermos varones. Diferencias clínicas entre los varones y las mujeres fueron descritas previamente en otras familias SPG4.^16,17

Se realizó un estudio especial en 15 familias con PEHAD, no emparentadas entre sí, originarias del sur de Escocia. Nueve de ellas tenían PEHAD ligada al locus SPG4 y el análisis de secuencia de dicho gen mostró la misma nueva mutación missens p.N386S.¹⁸ El análisis de haplotipos sugirió sólidamente la existencia de efecto fundador en la población escocesa. Con el objetivo de clarificar el papel patogénico de la mutación mencionada, ubicada dentro de un dominio de unión a ATP Walker A conservado, estudiamos la localización intracelular de la espastina natural y de la espastina mutada en cultivos celulares. Hasta la fecha se informó tanto su localización nuclear como citoplasmática.^19,20 La espastina p.N386S expresada en células eucariotas mostró interacción estructural con un subconjunto de microtúbulos, lo que indujo la desaparición del áster y la formación de densos haces perinucleares.¹⁸ Esta localización subcelular anormal concuerda con resultados previos obtenidos con la expresión de otras mutaciones missens en el dominio AAA de la espastina, y sugiere que esa proteína posee una función en la dinámica de los microtúbulos.²⁰ Respecto del fenotipo clínico, la expresión del gen SPG4 es considerada un ejemplo típico de PEH no complicada. Sin embargo, el examen clínico de los miembros afectados con la mutación p.N386S demostró variación fenotípica intrafamiliar e interfamiliar, que incluyó una amplia variación de edad de inicio y duración de la enfermedad, así como características neurológicas adicionales. Se observó retraso mental en dos pacientes de dos familias distintas, y la RMN mostró CCD asociado con atrofia cerebelosa leve en otros dos hermanos afectados, sin signos clínicos de ataxia.¹⁸ Existen datos previos de deterioro cognitivo, e incluso de demencia, como manifestación clínica de la PEH vinculada al gen SPG4 en algunas familias.^21,22 El subtipo de PEH complicada con CCD es frecuente,^23,24 pero ese rasgo no había sido asociado con SPG4 anteriormente. La mutación p.N386S y el defecto genético de la PEHAR podrían compartir algún mecanismo común que resultaría en alteración del desarrollo o degeneración del cuerpo calloso, del cerebelo y del haz corticoespinal. Es posible que estas características se asocien específicamente con la mutación p.N386S de SPG4, pero no están presentes en sujetos portadores de tal mutación. Este ejemplo de variabilidad intrafamiliar implica la participación de otros factores genéticos o medioambientales moderadores en la determinación del fenotipo de PEH.

Nuestro estudio genético en familias escocesas con PEHAD reveló heterogeneidad genética adicional en este trastorno. En seis familias se excluyó la relación con cualquiera de los locus conocidos de PEHAD. El examen clínico indicó ausencia de rasgos neurológicos adicionales en cinco familias, pero otra pareció estar afectada por un trastorno genético independiente, con características clínicas únicas.²⁴ Los pacientes integrantes de ese linaje (SCO-B02) presentaron hipoacusia debida a neuropatía auditiva, pie cavo y vómitos persistentes vinculados a hernia paraesofágica, un tipo infrecuente de hernia hiatal que no se había informado previamente en sujetos con PEH. El pie cavo y la hernia de hiato habían sido ya descritos en dos familias con PEHAD complicada vinculada al locus SPG9, pero esas familias mostraron rasgos adicionales, como cataratas y debilidad muscular debida a neuropatía motora axonal. Los estudios neurofisiológicos no encontraron compromiso de la motoneurona inferior en la familia SCO-B02. En dicho linaje, que incluyó 19 individuos afectados, se observó menor edad de comienzo de la enfermedad y el análisis de las generaciones siguientes pareció mostrar anticipación genética. Este hallazgo fue apoyado por el incremento de la gravedad del trastorno en las generaciones siguientes. Se realizó una búsqueda amplia del genoma en dicha familia y se identificó un nuevo locus (SPG29) en el cromosoma 1p para esta forma infrecuente de PEHAD complicada. Luego de establecido el vínculo con el nuevo locus SPG29 se estudiaron marcadores adicionales y se localizó la región candidata en el cromosoma 1p31.1-1p21.1, limitada a 22.3 cM, entre los marcadores D1S2889 y D1S248. Se realizó el mapeo de 147 transcripciones en la región de SPG29. Consideramos las siguientes como posibles indicadoras de genes candidatos en SPG29, correspondientes a 5 clases diferentes, de acuerdo con la función de los genes actualmente conocidos responsables de PEH: 1) proteínas mitocondriales (SH3GLB1), 2) proteínas relacionadas con el transporte axonal o el desarrollo neuronal (CGI-100, LPPR4 y NTNG1), 3) proteínas de transporte a través de la membrana e intracelular (SNX7), 4) proteínas de unión a guanilato (GBP1-6), y 5) proteínas de adhesión celular (VCAM1 y LOC126987). La secuenciación del gen SNX7, que codifica la proteína sorting nexin 7, la cual participa en el pasaje intracelular y el transporte de proteínas, reveló la sustitución de un aminoácido (p.R60P) en un paciente de la familia con SPG29. Posteriormente, el gen SNX7 se excluyó como responsable de la enfermedad mediante análisis de secuencia en los otros miembros de la familia, lo que demostró que el alelo diferente no era segregado con la enfermedad. Dado que la familia con SPG29 pareció sufrir anticipación genética, incluimos en la lista de genes candidatos dos transcripciones que contenían una secuencia con repetición de un triplete en las regiones laterales: FLJ11006 y nPTB, con secuencias marginales con repetición de (AAT)n y (CCG)n, respectivamente. El fenómeno de anticipación genética se asocia con la longitud de secuencias inestables con repetición de tripletes en numerosas formas de ataxia espinocerebelosa,²⁵ de modo que los genes que contengan la repetición de tripletes podrían ser candidatos de paraparesia espástica. Si se confirmara anticipación genética en otras familias portadoras de SPG29, FLJ11006 y nPTB podrían representar candidatos para ese locus. Actualmente, se encuentra en curso la secuenciación de otros genes candidatos. Sin embargo, la participación de algún gen no esperado en la degeneración de las neuronas motoras o en alteraciones durante su desarrollo es siempre una posibilidad, tal como se observa en la PEH tipo síndrome de Silver ligada a SPG17. Esta forma de PEH es causada por mutaciones heterocigotas del gen BSCL2, en tanto que las mutaciones completas son responsables de la lipodistrofia congénita de Berardinelli-Seip.^9,10 Es necesario encontrar otras familias ligadas a SPG29 para limitar la región candidata e identificar genes posiblemente responsables en esa posición.

Se realizó un análisis de ligamiento en una numerosa familia italiana con PEHAD, en la cual 16 miembros de cuatro generaciones estaban afectados.²⁶ Este linaje mostró una forma pura de la enfermedad, con edad temprana de inicio y rápida progresión de los síntomas. Se obtuvo confirmación de ligamiento con el locus SPG12 (19q13) y los resultados se combinaron con los de estudios genéticos previos,^27,28 lo que permitió limitar dicho locus a una región de 3.3 cM, entre los marcadores D19S416 y D19S220. Una proteína homóloga de la familia AAA, una ATPasa de la subunidad 26S del proteasoma, ubicada cerca de D19S220, fue analizada para identificar al gen candidato. La secuenciación de los exones de codificación y de las secuencias flanqueantes del gen no mostró ninguna mutación.²⁶

Se llevó a cabo el análisis de secuencia de otros genes conocidos de PEHAD (SPG6, SPG3A y HSP60-HSP10) en los pacientes sin mutaciones en el gen SPG4. Encontramos una mutación nueva de SPG6 en una familia japonesa con PEHAD pura.²⁹ Los dos miembros afectados mostraron heterocigocidad para una mutación missens en el exón 3 (p.A100T). Hasta la fecha, se identificaron solamente tres mutaciones missens en familias con PEHAD ligada a SPG6: p.T45R, p.A100T y p.G106R. Esta última sustitución de aminoácidos se halló en cuatro familias de diferente origen étnico, debido a dos sustituciones distintas de nucleótidos: c.316G>A y c.316G>C.^30,31 Identificamos la misma mutación en una familia portadora de SPG6 de Brasil, lo que confirmó que el codón 106 podría ser el sitio inestable promotor de la mutación en NIPA1.³²

El análisis de secuencia de SPG3A llevó a la identificación de una nueva mutación missens (p.Y459C) en una familia japonesa.³³ El probando era una mujer con trastornos de la locomoción, detectado en su infancia temprana, y espasticidad muy grave en las extremidades inferiores. Otras características clínicas informadas previamente en la PEH asociada a SPG3A, como disminución de la sensibilidad vibratoria en los miembros inferiores y escoliosis,³⁴ no se observaron en dicha paciente.

Se analizaron los genes HSP60 y HSP10, ambos candidatos responsables para el locus SPG13, mediante la secuenciación de los 11 exones de codificación de HSP60, los 4 exones de HSP10 y de la región promotora bidireccional interviniente. No se detectó ninuna variación en las secuencias de codificación, en los exones/intrones limitantes ni en la región promotora. Hasta el momento, una sola mutación del gen HSP60 (p.V721) se asoció con casos de PEH vinculada a SPG13.⁸ Los resultados de los análisis de mutaciones realizados en el presente estudio se resumen en la tabla 2. La frecuencia de las mutaciones en SPG4 en nuestro trabajo acerca de la PEHAD fue 20%, concordante con las cifras observadas en diferentes poblaciones, las que oscilan entre 13.5% y 40% a 50%.^1,4,13,35-37 El descubrimiento de una mutación con efecto fundador en la población escocesa es destacable, ya que las mutaciones recurrentes del gen para espastina son poco habituales. De todos modos, se notificaron algunas mutaciones recurrentes en poblaciones específicas.^13,38,39 Hallamos baja frecuencia de las mutaciones SPG6 y SPG3A (3% y 2%, respectivamente). Al momento actual, no se ha establecido la tasa de PEHAD causada por mutaciones del gen NIPA1. Un estudio realizado en familias chinas con PEHAD sugiere que las mutaciones de ese gen pueden constituir una causa bastante frecuente de PEH,³¹ pero nuestra investigación no parece confirmar ese resultado. En nuestro estudio, se anticipaba hallar mayor frecuencia de mutaciones SPG3A, ya que su prevalencia informada corresponde aproximadamente al 10% de las PEHAD. Aunque existe evidencia que SPG3A puede asociarse también con PEHAD de comienzo tardío,⁴⁰ este gen es habitualmente responsable de enfermedad de inicio antes de los 20 años de edad y es la causa más frecuente de PEH de presentación antes de los 10 años.⁴¹ Finalmente, el resultado negativo obtenido en el análisis de HSP60-HSP10 indica que estos genes rara vez presentan mutaciones en la PEHAD. Nuestro estudio genético tambien demostró que cuatro de los genes causales (SPG3A, SPG6, SPG10 y SPG13) presentan mutaciones con poca frecuencia en los casos de PEH esporádica, de forma de presentación pura, como los incluidos en Italia.

Algunas investigaciones genéticas recientes acerca de la PEH contribuyeron a aclarar los mecanismos moleculares de neurodegeneración del haz corticoespinal. Aunque se hallaron defectos genéticos en algunas formas de PEH, se desconoce aún el motivo por el cual el proceso neurodegenerativo se restringe principalmente al tracto mencionado. Tal como se observa en otros trastornos neurodegenerativos hereditarios, incluidas la enfermedad de Alzheimer,⁴² la enfermedad de Parkinson⁴³ y la esclerosis lateral amiotrófica,⁴⁴ los genes responsables son expresados de manera ubicua, pero el proceso degenerativo ocurre en estructuras neuronales específicas. La enfermedad de Alzheimer y la paraparesia espástica se observan con frecuencia en pacientes portadores de ciertas mutaciones en el gen para presenilina 1 (PS1), hecho que sugiere que los procesos biológicos conducentes a dos fenotipos diferentes podrían ser provocados por un único defecto genético.⁴⁵ Las mutaciones del gen alsina, en el locus ALS2, mostraron tres fenotipos distintos: parálisis espástica ascendente de inicio en el lactante, formas de comienzo juvenil de enfermedad de neurona motora tipo esclerosis lateral amiotrófica y esclerosis lateral primaria de inicio juvenil,^46-49 lo que sugiere que otros factores desconocidos, genéticos o no, podrían contribuir a la patología en las alteraciones genéticas de la proteína alsina. El mayor conocimiento de la correlación entre genotipo y fenotipo contribuirá a comprender mejor los mecanismos responsables de la PEH. Además, la manipulación genética en ratones o en cultivos celulares podría revelar los mecanismos subyacentes a la neurodegeneración en la PEH.

Bibliografía del artículo
1. Fink JK. The hereditary spastic paraplegias: nine genes and counting. Arch Neurol 2003; 60(8):1045-1049.
2. Reid E. Science in motion: common molecular pathological themes emerge in the hereditary spastic paraplegias. J Med Genet 2003; 40(2):81-86.
3. Al-Yahyaee S, Al-Gazali LI, De Jonghe P, et al. A novel locus for hereditary spastic paraplegia with thin corpus callosum and epilepsy. Neurology 2006; 66(8):1230-1234.
4. Hazan J, Fonknechten N, Mavel D, et al. Spastin, a new AAA protein, is altered in the most frequent form of autosomal dominant spastic paraplegia. Nat Genet 1999; 23(3):296-303.
5. Zhao X, Alvarado D, Rainier S, et al. Mutations in a newly identified GTPase gene cause autosomal dominant hereditary spastic paraplegia. Nat Genet 2001; 29(3):326-331.
6. Rainier S, Chai JH, Tokarz D, Nicholls RD, Fink JK. NIPA1 gene mutations cause autosomal dominant hereditary spastic paraplegia (SPG6). Am J Hum Genet 2003; 73(4):967-971.
7. Reid E, Kloos M, Ashley-Koch A, et al. A kinesin heavy chain (KIF5A) mutation in hereditary spastic paraplegia (SPG10). Am J Hum Genet 2002; 71(5):1189-1194.
8. Hansen JJ, Durr A, Cournu-Rebeix I, et al. Hereditary spastic paraplegia SPG13 is associated with a mutation in the gene encoding the mitochondrial chaperonin Hsp60. Am J Hum Genet 2002; 70(5):1328-1332.
9. Van de Warrenburg BP, Scheffer H, Van Eijk JJ, et al. BSCL2 mutations in two Dutch families with overlapping Silver syndrome-distal hereditary motor neuropathy. Neuromuscul Disord 2006; 16(2):122-125.
10. Magre J, Delepine M, Khallouf E, et al. Identification of the gene altered in Berardinelli-Seip congenital lipodystrophy on chromosome 11q13. Nat Genet 2001; 28(4):365-370.
11. Zuchner S, Wang G, Tran-Viet KN, et al. Mutations in the novel mitochondrial protein REEP1 cause hereditary spastic paraplegia type 31. Am J Hum Genet 2006; 79(2):365-9.
12. Mannan AU, Krawen P, Sauter SM, et al. ZFYVE27 (SPG33), a novel spastin-binding protein, is mutated in hereditary spastic paraplegia. Am J Hum Genet 2006; 79(2):351-357.
13. Meijer IA, Hand CK, Cossette P, Figlewicz DA, Rouleau GA. Spectrum of SPG4 mutations in a large collection of North American families with hereditary spastic paraplegia. Arch Neurol 2002; 59(2):281-286.
14. Orlacchio A, Gaudiello F, Totaro A, et al. A new SPG4 mutation in a variant form of spastic paraplegia with congenital arachnoid cysts. Neurology 2004; 62(10):1875-1878.
15. Orlacchio A, Kawarai T, Gaudiello F, et al. Clinical and genetic study of a large SPG4 Italian family. Mov Disord 2005; 20(8):1055-1059.
16. Higgins JJ, Loveless JM, Goswami S, et al. An atypical intronic deletion widens the spectrum of mutations in hereditary spastic paraplegia. Neurology 2001; 56(11):1482-1485.
17. Starling A, Rocco P, Passos-Bueno MR, Hazan J, Marie SK, Zatz M. Autosomal dominant (AD) pure spastic paraplegia (HSP) linked to locus SPG4 affects almost exclusively males in a large pedigree. J Med Genet 2002; 39(12):e77.
18. Orlacchio A, Kawarai T, Totaro A, et al. Hereditary spastic paraplegia: clinical genetic study of 15 families. Arch Neurol 2004; 61(6):849-55.
19. Charvin D, Cifuentes-Diaz C, Fonknechten N, et al. Mutations of SPG4 are responsible for a loss of function of spastin, an abundant neuronal protein localized in the nucleus. Hum Mol Genet 2003; 12(1):71-78.
20. Errico A, Ballabio A, Rugarli EI. Spastin, the protein mutated in autosomal dominant hereditary spastic paraplegia, is involved in microtubule dynamics. Hum Mol Genet 2002; 11(2):153-163.
21. Tallaksen CM, Guichart-Gomez E, Verpillat P, et al. Subtle cognitive impairment but no dementia in patients with spastin mutations. Arch Neurol 2003; 60(8):1113-1118.
22. McMonagle P, Byrne P, Hutchinson M. Further evidence of dementia in SPG4-linked autosomal dominant hereditary spastic paraplegia. Neurology 2004; 62(3):407-410.
23. Winner B, Uyanik G, Gross C, et al. Clinical progression and genetic analysis in hereditary spastic paraplegia with thin corpus callosum in spastic gait gene 11 (SPG11). Arch Neurol 2004; 61(1):117-121.
24. Orlacchio A, Kawarai T, Gaudiello F, St George-Hyslop PH, Floris R, Bernardi G. New locus for hereditary spastic paraplegia maps to chromosome 1p31.1-1p21.1. Ann Neurol 2005; 58(3):423-429.
25. Stevanin G, Durr A, Brice A. Clinical and molecular advances in autosomal dominant cerebellar ataxias: from genotype to phenotype and physiopathology. Eur J Hum Genet 2000; 8(1):4-18.
26. Orlacchio A, Kawarai T, Rogaeva E, et al. Clinical and genetic study of a large Italian family linked to SPG12 locus. Neurology 2002; 59(9):1395-1401.
27. Reid E, Dearlove AM, Osborn O, Rogers MT, Rubinsztein DC. A locus for autosomal dominant "pure" hereditary spastic paraplegia maps to chromosome 19q13. Am J Hum Genet 2000; 66(2):728-732.
28. Ashley-Koch A, Bonner ER, Gaskell PC, et al. Fine mapping and genetic heterogeneity in the pure form of autosomal dominant familial spastic paraplegia. Neurogenetics 2001; 3(2):91-97.
29. Kaneko S, Kawarai T, Yip E, et al. Novel SPG6 mutation p.A100T in a Japanese family with autosomal dominant form of hereditary spastic paraplegia. Mov Disord 2006
30. Reed JA, Wilkinson PA, Patel H, et al. A novel NIPA1 mutation associated with a pure form of autosomal dominant hereditary spastic paraplegia. Neurogenetics 2005; 6(2):79-84.
31. Chen S, Song C, Guo H, et al. Distinct novel mutations affecting the same base in the NIPA1 gene cause autosomal dominant hereditary spastic paraplegia in two Chinese families. Hum Mutat 2005; 25(2):135-141.
32. Munhoz RP, Kawarai T, Teive HA, et al. Clinical and genetic study of a Brazilian family with spastic paraplegia (SPG6 locus). Mov Disord 2006; 21(2):279-281.
33. Matsui M, Kawarai T, Hase Y, et al. Novel mutation in SPG3A gene (atlastin) in hereditary spastic paraplegia. Journal of Neurology 2006.
34. Durr A, Camuzat A, Colin E, et al. Atlastin1 mutations are frequent in young-onset autosomal dominant spastic paraplegia. Arch Neurol 2004; 61(12):1867-1872.
35. Sauter S, Miterski B, Klimpe S, et al. Mutation analysis of the spastin gene (SPG4) in patients in Germany with autosomal dominant hereditary spastic paraplegia. Hum Mutat 2002; 20(2):127-132.
36. Hentati A, Deng HX, Zhai H, et al. Novel mutations in spastin gene and absence of correlation with age at onset of symptoms. Neurology 2000; 55(9):1388-1390.
37. Proukakis C, Auer-Grumbach M, Wagner K, et al. Screening of patients with hereditary spastic paraplegia reveals seven novel mutations in the SPG4 (Spastin) gene. Hum Mutat 2003; 21(2):170.
38. Fonknechten N, Mavel D, Byrne P, et al. Spectrum of SPG4 mutations in autosomal dominant spastic paraplegia. Hum Mol Genet 2000; 9(4):637-644.
39. Magariello A, Muglia M, Patitucci A, et al. Novel spastin (SPG4) mutations in Italian patients with hereditary spastic paraplegia. Neuromuscul Disord 2006; 16(6):387-390.
40. Sauter SM, Engel W, Neumann LM, Kunze J, Neesen J. Novel mutations in the Atlastin gene (SPG3A) in families with autosomal dominant hereditary spastic paraplegia and evidence for late onset forms of HSP linked to the SPG3A locus. Hum Mutat 2004; 23(1):98.
41. Namekawa M, Ribai P, Nelson I, et al. SPG3A is the most frequent cause of hereditary spastic paraplegia with onset before age 10 years. Neurology 2006; 66(1):112-114.
42. St George-Hyslop PH, Petit A. Molecular biology and genetics of Alzheimer's disease. C R Biol 2005; 328(2):119-130.
43. Pallanck L, Greenamyre JT. Neurodegenerative disease: pink, parkin and the brain. Nature 2006; 441(7097):1058.
44. Majoor-Krakauer D, Willems PJ, Hofman A. Genetic epidemiology of amyotrophic lateral sclerosis. Clin Genet 2003; 63(2):83-101.
45. Rogaeva E, Bergeron C, Sato C, et al. PS1 Alzheimer's disease family with spastic paraplegia: the search for a gene modifier. Neurology 2003; 61(7):1005-1007.
46. Panzeri C, De Palma C, Martinuzzi A, et al. The first ALS2 missense mutation associated with JPLS reveals new aspects of alsin biological function. Brain 2006; 129(Pt 7):1710-1719.
47. Devon RS, Helm JR, Rouleau GA, et al. The first nonsense mutation in alsin results in a homogeneous phenotype of infantile-onset ascending spastic paralysis with bulbar involvement in two siblings. Clin Genet 2003; 64(3):210-215.
48. Lesca G, Eymard-Pierre E, Santorelli FM, et al. Infantile ascending hereditary spastic paralysis (IAHSP): clinical features in 11 families. Neurology 2003; 60(4):674-682.
49. Eymard-Pierre E, Lesca G, Dollet S, et al. Infantile-onset ascending hereditary spastic paralysis is associated with mutations in the alsin gene. Am J Hum Genet 2002; 71(3):518-527.