IDENTIFICAÇAO POR PCR-MULTIPLEX DE ESPECIES DE MYCOBACTERIUM(especial para SIIC © Derechos reservados) |
A PCR multiplex é uma ferramenta (es una herramienta) superior para diferenciar Mycobacterium tuberculosis de micobactérias não-tuberculosas quando utilizada em (cuando se utiliza en) combinação com testes (con pruebas) bioquímicos e cultura (y de cultivo) . |
Autor: Rosemeri Maurici Da Silva Columnista Experta de SIIC Institución: Universidade Federal de Santa Catarina Artículos publicados por Rosemeri Maurici Da Silva |
Coautores Susie Coutinho Liedke* Luciana Daikuara** Simone Gonçalves Senna*** Christine Lourenço Nogueira* Letícia Muraro Wildner* Maria Luiza Bazzo* Farmacéutico, Universidade Federal de Santa Catarina, Florianópolis, Brasil* Estudante do Curso de Graduação em Farmácia – Análises Clínicas, Universidade Federal de Santa Catarina, Florianópolis, Brasil** Biólogo, Universidade Federal de Santa Catarina, Florianópolis, Brasil*** |
Recepción del artículo 29 de Junio, 2014 |
Aprobación 18 de Agosto, 2014 |
Primera edición 29 de Septiembre, 2014 |
Segunda edición, ampliada y corregida 7 de Junio, 2021 |
Resumen
Reação em cadeia da (La reacción en cadena de la) polimerase multiplex (PCR- multiplex) é um (es un) método diagnostico potencialmente útil para identificação rápida e acurada (y exacta) de Mycobacterium tuberculosis (TB) e de micobactérias não-tuberculosas (MNT) clinicamente relevantes. Este sistema multi-iniciadores (multiprimers) é capaz de identificar o (el) antígeno alfa de 32-kDa presente na (en la) maioria das (de las) espécies do gênero Mycobacterium, a sequência de inserção IS6110 pertencente ao complexo (al complejo) TB e as sequências espécie-específicas do (del) gene mtp40 de Mycobacterium tuberculosis. Cento e oito amostras (Ciento ocho muestras) (escarro [esputo] e extra-pulmonares) oriundas do Setor de Tuberculose do Laboratório Central de Saúde Pública de Santa Catarina (LACEN/SC) foram processadas e analisadas no Laboratório de Biologia Molecular e Micobactérias (LBMM) da Universidade Federal de Santa Catarina, Florianópolis, Brasil, entre janeiro e junho de 2011, representando 30% das amostras (de las muestras) positivas/ano no (al año en el) LACEN/SC. Dos (Entre los) 108 isolados (aislamientos), 80% foram identificados como TB e 20% como MNT. Os resultados da PCR multiplex foram comparados com os resultados do PRA-hsp65 (PCR do gene hsp65 seguida por análise de restrição enzimática) e demonstraram 100% de concordancia (índice de concordância kappa 1). A PCR multiplex é uma ferramenta (es una herramienta) superior para diferenciar TB de MNT quando utilizada em (cuando se utiliza en) combinação com testes (análisis) bioquímicos e cultura. Além disso (Además), apresenta melhor custo efetividade (presenta mejor costo-eficacia) do que outros ensaios moleculares e tem sido (y ha sido) utilizada como uma ferramenta para estudos epidemiológicos para classificação e distinção entre TB e MNT. PCR multiplex é um método rápido, sensível e específico para identificação de micobactérias e útil na rotina (y de utilidad en la rutina) de laboratórios clínicos.
Palabras clave
tuberculose, pcr multiplex, biologia molecular, tuberculosis, biología molecular, PCR multiplex
Abstract
Multiplex polymerase chain reaction (PCR) is a potentially useful diagnostic tool for fast and accurate identification of clinically relevant non-tuberculous mycobacteria (NTM) and Mycobacterium tuberculosis (TB). This multiprimer system is able to identify the 32-kDa antigen present in most Mycobacterium genus species, the IS6110 insertion sequence belonging to the TB complex and the species-specific sequence of the mtp40 gene in TB. One hundred and eight randomly selected sputum and extra-pulmonary samples from the Reference Center Laboratory for Public Health in the State of Santa Catarina (LACEN/SC) were processed and analyzed at the Laboratory of Molecular Biology and Mycobacteria (LMBM), Federal University of Santa Catarina, Florianopolis, Brazil, between January and June 2011, representing 30% of the positive samples received annually at LACEN/SC. Of the 108 isolates, 80% were identified as TB and 20% as NTM. The multiplex PCR results were compared with PCR-restriction enzyme analysis of the hsp65 gene (PRA-hsp65), demonstrating 100% concordance (Kappa index 1). Multiplex PCR is a superior tool to differentiate between TB and NTM when used in combination with biochemical tests and culture. In addition, it is more cost effective than other molecular biological assays and has been used as an epidemiological tool in strain classification and in distinguishing TB from NTM. Multiplex PCR is fast, sensitive and specific in mycobacteria identification and is, therefore, useful for routine clinical laboratory assays.
Key words
tuberculosis, multiplex pcr, molecular biology